Забор материала на урогенитальные инфекции

Обновлено: 17.05.2024

Забор материала на урогенитальные инфекции

Вы не можете посетить текущую страницу по причине:

просроченная закладка/избранное
поисковый механизм, у которого просрочен список для этого сайта
пропущен адрес
у вас нет права доступа на эту страницу
Запрашиваемый ресурс не найден.
В процессе обработки вашего запроса произошла ошибка.

Пожалуйста, перейдите на одну из следующих страниц:

Если проблемы продолжатся, пожалуйста, обратитесь к системному администратору сайта и сообщите об ошибке, описание которой приведено ниже..

Правила забора клинического материала из урогенитального тракта

У женщин при исследовании материалов из урогенитального тракта взятие образцов желательно проводить приблизительно в середине менструального цикла (если заболевание не имеет явных проявлений) или в дни, когда нет кровянистых выделений при обострении процесса); у мужчин при исследовании материалов взятие образцов из уретры необходимо проводить при условии задержки мочеиспускания не менее 3-4 часов; если нет возможности придерживаться упомянутых условий, то следует помнить, что это может повлиять на качество мазков и исказить интерпретацию результатов микроскопии. Всегда необходимо учитывать, что проведение системной терапии, особенно антибактериальными препаратами, может значительно повлиять на результат микроскопического исследования и снизить его диагностическую ценность. Перед взятием образца важно понимать, какой материал должен быть взят, и что предполагается обнаружить. Обычно во время обследования пациента необходимо брать несколько клинических образцов (не только для микроскопии, но также и для других лабораторных исследований). Важно помнить, что: Материал из уретры для микроскопического исследования берется раньше всех других уретральных образцов сразу же после взятия выделений или проб для культурального исследования на гонококки.

Если имеются обильные выделения и подозревается трихомонадная или кандидозная инфекция, образец берется из заднего свода, где концентрация предполагаемого инфекционного агента наибольшая. Если количество выделений обычное, образец следует брать с боковой стенки влагалища. Этот клинический материал даст наиболее надежную информацию о состоянии влагалища в данный момент. Образец из шейки матки для микроскопического исследования берется раньше всех других цервикальных образцов или сразу же после взятия мазка для культурального исследования на гонококки. Мазок наносится на предметное стекло тонким слоем. Если количество материала небольшое, или Вы хотите поместить на одно стекло несколько образцов материала из разных локализаций у одного пациента, материал должен наноситься ближе центру стекла в заранее обозначенных областях.

Все мазки, приготовленные для направления в лабораторию, должны быть высушены на воздухе, промаркированы и, при необходимости, зафиксированы.

Правила забора клинического материала у мужчин для микроскопического исследования

Образец из уретры для окрашивания по Граму или метиленовым синим берется с помощью бактериологической петли объемом мкл. У мужчин при наличии выделений из уретры поверхность головки и область наружного отверстия уретры должны быть очищены с помощью марлевого тампона, и крайняя плоть отведена назад для предупреждения контаминации. При отсутствии свободных выделений необходимо попросить пациента слегка помассировать уретру скользящими движениями от основания пениса к его головке. В этом случае может быть использован ватный/дакроновый тампон для взятия материала. После введения пластиковой петли в уретру на -2 см необходимо плоскость «глазка» петли двигать к отверстию, слегка нажимая на стенки уретры. Не рекомендуется вращать петлю во время процедуры взятия образца. Для пациента это болезненно. После получения клинического материала петля накладывается на поверхность стекла и передвигается по нему несколько раз с легким нажатием. Петля должна оставить на стекле тонкую полоску клинического материала. Образец из препуциального мешка берется ватным/дакроновым тампоном.

Правила забора клинического материала у женщин для микроскопического исследования

Образец из уретры для окрашивания по Граму или метиленовым синим берется с помощью бактериологической петли объемом 1 мкл. При наличии большого количества выделений наружное отверстие должно быть очищено с помощью марлевого тампона. При отсутствии свободных выделений может быть проведен легкий массаж уретры, выполняемый врачом. После введения пластиковой петли в уретру на 1-2 см необходимо плоскость «глазка» петли двигать к отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковые стенки уретры. Не рекомендуется вращать петлю во время процедуры взятия образца. Для пациентки это болезненно. После получения клинического материала петля накладывается на поверхность стекла и передвигается по нему несколько раз с легким нажатием. Петля должна оставить на стекле тонкую полоску клинического материала. Образец из цервикального канала для приготовления окрашенных препаратов берется в зеркалах ватным/дакроновым тампоном, специальной щеточкой или ложечкой. Необходимо тщательно очистить наружное отверстие цервикального канала при помощи большого марлевого тампона от вагинальных выделений для предотвращения возможной контаминации. После введения тампона в шеечный канал на 1-2 см его вращают несколько раз. Клинический материал должен быть перенесен с тампона на стекло как можно более тонким слоем. Для микроскопического исследования окрашенных вагинальных мазков материал берется в зеркалах с заднего или боковых сводов бактериологической петлей 10 мкл и тонким слоем распределяется на предметном стекле.

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

В конце статьи см. словарь
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).
В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.

Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР - метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП).

Исследование урогенитального тракта методом ПЦР на ИППП ; № 383 Инфекции, передаваемые половым путём (ИППП)

Определение ДНК микроорганизмов, вызывающих наиболее распространенные инфекции передаваемые половым путем (ИППП) в вагинальных, цервикальных и уретральных соскобах эпителиальных клеток методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». Исследование урогени.

До 1 рабочего дня

тест методом ПЦР на коронавирус Covid-19, мазок из носа и зева на определение РНК вируса SARS-CoV-2; № 3320 COVID-19

Запись на исследование В случае получения положительного или сомнительного результата на COVID-19 и при необходимости проведения подтверждающего тестирования образец биоматериала может быть направлен в уполномоченную референс-лабораторию в соответствии с СП 3.1.3597-20, в связи с чем .

До 2 рабочих дней
Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях.
Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике - для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ - вирусов папилломы человека; в пульмонологии - для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии - для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний - в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии - для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов.
Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами - короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 - 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.

После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
термостабильная ДНК-полимераза;
дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.

Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 - 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 - 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 - 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 - 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 - 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 - 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 - 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию

Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой - позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота - биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков. РНК– рибонуклеиновая кислота - биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев - нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка. Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК. Нуклеоти́ды - основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию - адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) - гуанин, цитозиновый (C) - цитозин, тиминовый (Т) - тимин, урациловый (U) - урацил. В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов - A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа - A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК - рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания. Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.
Литература

ВАЖНО!

Правила забора материала для исследований на микрофлору урогенитального тракта и гонорею

Взятие материала для микробиологического исследования проводит врач при подозрении на инфекционную природу патологического процесса. Материал отбирается стерильным ватным тампоном, входящим в комплект системы для сбора и транспортировки биоматериала. После сбора материала тампон погружается в пробирку с транспортной средой. Пробирка маркируется заранее в соответствии с требованиями этикетажа.

Взятый для исследования материал отправляется в микробиологическую лабораторию для немедленного посева. При невозможности выполнить это требование транспортная пробирка с материалом должна храниться до отправки при комнатной температуре.

Параллельно с взятием материала на посев врач готовит мазки для микроскопии (в количестве не менее двух), используя для этого два стерильных стекла, отдельные стерильные тампоны или стерильные гинекологические инструменты. Мазок фиксируют 95% спиртом, покрывают чистым предметным стеклом и помещают в индивидуальный полиэтиленовый пакет и отправляют в лабораторию. Хранение влажного мазка, сдавленного между двумя стеклами, недопустимо.

Вульва, преддверие влагалища. Отделяемое берут стерильным ватным тампоном. Тампон несколько раз вращают вокруг оси для захвата биоматериала. Время контакта тампона со слизистой- 10 сек. При воспалении бартолиниевых желез производят их пункцию, при вскрытии абсцесса железы гной берут стерильным ватным тампоном.

Влагалище. После введения зеркала и подъемника материал для исследования берут стерильным ватным тампоном из заднего свода или с патологически измененных участков слизистой. Тампон несколько раз вращают вокруг оси для захвата биоматериала. Время контакта тампона со слизистой- 10 сек.

Материал для посева должен быть взят до проведения мануального исследования.

Шейка матки. После обнажения шейки матки в зеркалах влагалищную часть ее тщательно обрабатывают ватным тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором или стерильной водой. После этого стерильным ватным тампоном, осторожно введенным в цервикальный канал на 2 см., не касаясь стенок влагалища, берут материал для исследования. Тампон несколько раз вращают вокруг оси для захвата биоматериала. Время контакта тампона со слизистой- 10 сек.

Матка. Правильное взятие материала из матки может быть выполнено только при использовании специальных инструментов типа шприца - аспиратора, имеющего на зонде покрытие. После прохождения зондом цервикального канала в полости матки раскрывают наружную оболочку зонда и набирают в шприц содержимое матки. После этого закрывают наружную оболочку и зонд выводят из матки. Содержимое шприца переносят на стерильный ватный тампон.

Придатки матки. При воспалительном процессе в придатках матки получение материала из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки органов) становится возможным только при оперативном вмешательстве или при проведении диагностической пункции опухолевидных образований в малом тазу, проводимой через влагалищные своды.

В некоторых случаях острого воспалительного процесса, если очаг инфекции в придатках матки сообщается с полостью матки, полезными могут оказаться повторные исследования отделяемого цервикального канала.

Взятие материала у мужчин

Из уретры материал берут после 4-5 часового воздержания от мочеиспускания. Предварительно обрабатывают головку полового члена марлевым тампоном, смоченным физиологическим раствором. Биоматериал собирают на стерильный тампон из комплекта транспортной системы. Тампон вводят в наружное отверстие мочеиспускательного канала на глубину до 3 см. производят несколько осторожных вращательных движений. Время контакта тампона со слизистой 10 секунд.

Требование к доставке проб материала

- Тубсеры с биоматериалом в транспортной среде хранятся и транспортируются при температуре не ниже 18°С.

- Полученный биоматериал доставляется в лабораторию не позднее 24 часов.

- Направление, маркировка стекол и маркировка пробирки - тубсера с биоматериалом - должны быть четкими, сведения должны совпадать.

- Предметные стекла для микроскопии в баклабораторию доставляются в индивидуальных укладках.

Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка (Bacterioscopic examination of different smears (vaginal, cervical, urethral, sputum, etc.)

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер.

Мазок на флору : показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Показания к назначению исследования

Мазок на флору (бактериоскопия) – простой, недорогой, эффективный метод визуального анализа биологического материала под микроскопом, который позволяет получить представление о функциональном состоянии различных органов, оценить наличие или отсутствие воспалительного процесса и степень его выраженности. В лаборатории мазок окрашивают специальными реагентами. Различные микроорганизмы окрашиваются в разные цвета, что позволяет их идентифицировать. Такая процедура называется окрашиванием по Граму. Кроме изучения под микроскопом, собранный биологический материал может быть использован для бактериологического анализа-посева на микрофлору, что поможет максимально точно выявить возбудителей инфекций, их пропорциональное соотношение и даже чувствительность к тем или иным антибиотикам.

Бактерии делятся на грамположительные (Грам (+)) и грамотрицательные (Грам (-)). Хотя есть ряд бактерий, которые не имеют специфической окраски по Граму.

Спектр бактерий меняется в зависимости от локализации в организме (заселения тех или иных слизистых оболочек и органов). Это первичная диагностика, которая позволяет выявить заболевания на ранних стадиях, а также назначить лечение. Метод широко используется врачами разных специальностей при подозрении на инфекционный процесс и при наличии гнойно-воспалительных проявлений заболевания. Кроме того, мазок на флору применяют в рамках диспансерных обследований в гинекологической и акушерской практике.

Существует несколько видов лабораторного исследования мазка на флору.

Гинекологический мазок на микрофлору. Представляет собой общее исследование, которое позволяет проверить состояние слизистой влагалища. Дополнительно диагностируются патологии, которые нередко вызывают болезнетворные микроорганизмы, - кандидоз, вагиноз, цервицит. При выполнении такого бактериоскопического исследования можно диагностировать заболевания, которые передаются половым путем.

Мазок на микрофлору у мужчин (урологический мазок). Микроскопическое исследование позволяет определить состав микрофлоры мочеиспускательного канала (уретры) мужчины, выявить воспаление в уретре (уретрит), а также ряд специфических возбудителей, таких как трихомонады и гонококки.

Показания к анализу гинекологического или урологического мазка являются:

профилактический осмотр;
боль в процессе мочеиспускания;
дискомфорт или боли внизу живота;
патологические выделения;
зуд или раздражение половых органов.
подозрение на бесплодие;
любое заболевание, передающееся половым путем.

Микроскопию обязательно проводят женщинам во время беременности, чтобы исключить воспалительные процессы и половые инфекции, что необходимо для нормального вынашивания и рождения здорового ребенка.

Мазок на микрофлору не назначается для выявления раковых заболеваний, он не информативен при диагностике таких инфекций, как хламидиоз, ВИЧ, герпес и некоторых заболеваний, передающихся половым путем.

Мазки другой локализации. Показаниями к исследованию являются инфекционно-воспалительные заболевания ЛОР-органов, легких, глаз (при подозрении на гонококковую инфекцию), кожи, мягких тканей и др. Мазок на микрофлору полости рта — это обязательный анализ при подозрении на дифтерию или коклюш.

Подготовка к процедуре

Проводить исследования и сбор материала следует до начала лечения антибиотиками, антисептиками, противогрибковыми препаратами, если врач не назначил иное.

Следует соблюдать ряд требований перед сдачей гинекологического или урологического мазка:

минимум за два дня до сдачи исключить половые контакты;
не принимать ванну за сутки до анализа, ограничиться душем, провести гигиеническую процедуру внешних половых органов без применения моющих средств.
в день сдачи анализа не выполняют гигиенические процедуры половых органов.
за 2-3 часа до взятия мазка не рекомендуется мочиться, так как можно смыть из уретры необходимый для исследования материал.

При взятии мазка из зева на микрофлору строго запрещено принимать пищу и напитки за 2 часа до анализа; не чистить зубы и не полоскать горло; нельзя использовать растворы для полоскания горла или спреи, содержащие противомикробные средства или антибиотики.

За несколько суток до исследования микрофлоры из носа следует исключить местное применение растворов и мазей, содержащих антибиотики.

Более детальные инструкции в каждом отдельном случае предоставляет врач, назначивший исследование.

№ 445 Общие обзорные исследования: бактериоскопические и культуральные

Краткая характеристика Микроскопического исследования мазка, окрашенного по Граму Бактериоскопия (от лат. «скопео» – смотрю) – лабораторный метод исследования бактерий под микроскопом. Метод широко используется врачами разных специальностей при подозрении на инфекционный п.

Биологический материал со слизистых оболочек урогенитального тракта

При взятии материала для проведения культурального и микроскопического исследования пациент не должен принимать антибактериальные препараты в течение предшествующих двух недель.

Микроскопические исследования. Для приготовления нативного препарата на предметное стекло помещают каплю теплого стерильного физиологического раствора (37°С), полученный материал смешивают с физиологическим раствором, накрывают покровным стеклом и исследуют непосредственно после получения. Для проведения микроскопии окрашенного препарата материал высушивают на воздухе при комнатной температуре.

При приготовлении мазка для микроскопического исследования рекомендуется прокатывать тампон по стеклу, а не «намазывать» материал. Для получения материала используют ватные/дакроновые тампоны, бактериологические петли.

При взятии материала для проведения культурального исследования тампон с материалом оставляют в пробирке с транспортной средой. Для получения материала используют ватные/дакроновые тампоны, бактериологические петли.

При взятии материала для выявления ДНК/РНК рабочую часть зонда обламывают и оставляют в пробирке с транспортной средой. В случае невозможности обломить рабочую часть зонда, следует максимально полно смыть биологический материал с рабочей части в пробирку с транспортной средой, прижав ее к внутренней стороне пробирки и вращая по 5–10 раз по и против часовой стрелки. Недопустимо использование многоразовых ножниц для обрезания рабочей части зонда – это может привести к перекрестной контаминации биологического материала и, как следствие, получению ложноположительных результатов. При взятии образцов необходимо использовать только тот инструментарий, который рекомендован фирмой-производителем наборов реагентов (универсальные зонды, ватные/дакроновые тампоны, цитощетки).

Мазки (соскобы) со слизистой оболочки цервикального канала. Доступ к цервикальному каналу обеспечивают с помощью одноразового или многоразового стерильного гинекологического зеркала. Удаляют слизь и отделяемое влагалища с поверхности шейки матки стерильным марлевым тампоном, вводят рабочую часть зонда (тампона) в цервикальный канал на 1–2 см и делают два–три полных оборота по часовой стрелке. Извлекают зонд (тампон) и помещают его рабочую часть, содержащую взятый материал, в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу.

Мазки (соскобы) со слизистой оболочки уретры женщин. При наличии выделений из уретры их следует удалить ватным тампоном перед взятием материала. Зонд (тампон) вводят в уретру на 1–2 см, вращают в течение нескольких секунд, затем вынимают и помещают в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу.

Мазки (соскобы) со слизистой оболочки влагалища. Во влагалище вводят стерильное гинекологического зеркало. При наличии обильных выделений их предварительно удаляют ватным тампоном. Материал для исследования собирают зондом (тампоном) из заднего и боковых сводов влагалища. Затем зонд (тампон) помещают в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу. Допустимо умеренное присутствие примесей в виде слизи и крови.

У девственниц: Зонд (тампон) вводят во влагалище через гименальное отверстие и собирают материал с задней стенки влагалища. Затем зонд (тампон) помещают в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу. Допустимо умеренное присутствие примесей в виде слизи и крови.

Мазки (соскобы) со слизистой оболочки уретры мужчин. Перед взятием соскоба из уретры обрабатывают головку полового члена в области наружного отверстия уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Производят массаж уретры. При наличии свободно стекающих из уретры выделений удаляют их сухим тампоном. Вводят зонд (тампон) в уретру на глубину 1–2 см. Несколькими вращательными движениями производят соскоб эпителиальных клеток и переносят зонд в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу.

Мазки (соскобы) со слизистой крайней плоти. Крайнюю плоть сдвигают по направлению к основанию полового члена. Зондом (тампоном) производят соскоб эпителиальных клеток со слизистой крайней плоти и переносят зонд в пробирку с транспортной средой или прокатывают по предметному стеклу.

Хранение образцов. Мазки (соскобы)

Микроскопическое исследование:

При необходимости транспортировки нативный препарат помещают в чашку Петри, в которой находится влажная фильтровальная бумага или ватный шарик, при доставке в лабораторию следует не допускать охлаждения, исследовать сразу после доставки.

Окрашенный препарат, предварительно высушенный на воздухе, стабилен в течение 24 ч. При необходимости более длительного хранения препарат фиксируют 96% спиртом в течение 3 мин.

Культуральное исследование:

для выявления Chlamydia trachomas – при температуре 2–8°С не более 24 ч;
для выявления Neisseria gonorrhoeae – при температуре 18–25°С не более 48 ч., не допускать охлаждение материала ниже 18°С;
для выявления Trichomonas vaginalis – при температуре 18–25°С не более 12 ч., не допускать колебаний температуры при хранении и транспортировке;
для выявления Herpes Simplex Virus – при температуре 18–25°С не более 24 ч.;
для выявления грибов рода Candida – при температуре 18–25°С не более 2 ч., при температуре 2–8°С не более 24 ч.

Транспортная среда, в которую помещают образцы биоматериала, и условия его хранения определяются инструкцией к используемому набору реагентов.

Лабораторная диагностика инфекций органов репродукции: анализы на урогенитальные инфекции

Урогенитальные инфекции относятся к группе репродуктивно значимых инфекций, и часто становятся причиной бесплодия, нарушения эректильной функции, осложнений беременности и родов, болезней новорожденных, воспалительных заболеваний половых органов.

Урогенитальные инфекции иначе называют инфекциями, передаваемыми половым путём (ИППП). Часто вместо термина ИППП, применяют термин ЗППП - заболевания, передаваемые половым путём. Разница между этими двумя терминами существенная. Многие урогенитальные инфекции длительное время протекают бессимптомно, человек не испытывает никаких неприятных ощущений и объективно «заболеванием» это назвать нельзя (скрытые или латентные инфекции). Но инфекция всё же присутствует, и возбудитель её размножается, а значит, носитель - источник инфекции для половых партнеров. Доказать наличие инфекции в бессимптомный период можно только по результатам лабораторного анализа.

Развитие клинически выраженного заболевания зависит от состояния иммунной системы, концентрации и вирулентности возбудителя инфекции. Зачастую первые симптомы ИППП появляются уже при развитии осложнений. Кроме того, клинические проявления большинства урогенитальных инфекций неспецифичны. Поэтому, даже при наличии симптомов, не всегда возможно поставить верный диагноз. В этом случае врачу также помогает анализ на урогенитальные инфекции.

Инфекций, передающихся половым путём большое количество, для многих из них половой путь не единственный путь передачи. Некоторые ИППП передаются через кровь, или препараты крови, а также от матери плоду и способны вызывать осложнения беременности и болезни новорожденного.

К ИППП относятся: сифилис, гонорея, хламидиоз, трихомониаз, герпес, мико- и уреаплазмоз, гарднереллез, кандидоз, вирус папилломы человека (ВПЧ), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), гепатиты и др. То есть ИППП могут быть бактериальной, вирусной, грибковой и протозойной природы. Среди возбудителей присутствуют условно-патогенные микроорганизмы, которые входят в состав естественной микрофлоры организма человека в небольшом количестве. Например, гарднереллы, некоторые виды микоплазм и уреаплазм, грибы рода кандида. Такие микроорганизмы вызывают заболевания только при определенных условиях: повышении их числа, ослаблении иммунитета, сопутствующем патологическом процессе, снижением количества «хорошей» флоры.

Рассмотрим на примере бактериального вагиноза. Бактериальный вагиноз - инфекционный невоспалительный синдром полимикробной этиологии, обусловленный изменением биоценоза влагалища (дисбактериозом): значительным снижением количества или полным отсутствием лактобактерий при увеличении количества условно-патогенных микроорганизмов, например, гарднерелл. Сам бактериальный вагиноз не является ИППП и «заразиться» им нельзя. Но он является фактором высокого риска возникновения воспалительных заболеваний половых органов, осложнений беременности и родов.

Инфекции, вызванные безусловно-патогенными микроорганизмами, например, хламидийная, гонококковая, микоплазменная инфекции, требуют обязательного лечения. При несвоевременной диагностике и отсутствии терапии, они способствуют развитию воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ) у женщин, воспаления яичков и его придатков у мужчин (эпидидимит, орхит). Впоследствии эти осложнения могут стать причиной бесплодия, невынашивания и других осложнений беременности и родов.

Сегодня ИППП занимают ведущее место в структуре инфекционной патологии. Ежедневно более 1 млн. человек заражаются ИППП. По данным Всемирной Организации Здравоохранения распространение урогенитальных инфекций имеет тенденцию к значительному росту.

В числе инфицированных урогенитальными инфекциями может оказаться любой человек, ведущий половую жизнь. И чем чаще происходит смена полового партнера, тем выше риск заражения. При этом всегда надо помнить, что отсутствие неприятных ощущений совсем не означает отсутствие инфекции. Важно периодически проходить лабораторные обследования на урогенитальные инфекции, так как ранний и точный диагноз позволит назначить эффективное лечение и избежать тяжелых осложнений.

Для лабораторной диагностики урогенитальных инфекций используют различные методы и технологии. Основу лабораторной диагностики урогенитальных инфекций составляют методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), из которых в нашей стране наиболее известным является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Анализы на инфекции органов репродукции (урогенитальных инфекций) в CMD

В лаборатории Центра молекулярной диагностики (CMD) доступны лабораторные исследования для выявления генетического материала (ДНК) отдельных возбудителей урогенитальных инфекций методом ПЦР. Анализ доступен как в качественном (выявление ДНК возбудителя), так и количественном (определение концентрации ДНК) форматах.

CMD предлагает тест на основе ПЦР в реальном времени в формате «Мультипрайм», позволяющий одновременно выявить четырех наиболее значимых патогенных возбудителей ИППП (гонореи, хламидиоза, трихомониаза и инфекции, вызванной M. genitalium).

Для выявления и определения концентрации условно-патогенных микоплазм и уреаплазм также разработан количественный ПЦР-тест в формате «Мультипрайм».

Новым стандартом в диагностике урогенитальных инфекций является метод NASBA (реакция транскрипционной амплификации) - прямой метод с высокой чувствительностью и специфичностью, позволяющий выявлять очень низкие концентрации основных возбудителей ИППП (гонореи, хламидиоза, трихомониаза и инфекции, вызванной микоплазмой гениталиум), характерные для стертых форм заболевания и инкубационного периода. NASBA выявляет преимущественно живых возбудителей, что позволяет в отличие от ПЦР избежать ложноположительных результатов.

Уникальный тест третьего поколения «ФЛОРОЦЕНОЗ» - результат многолетней работы учёных совместно с практикующими клиницистами. В исследование Флороценоз включены все ключевые микроорганизмы, которые позволяют поставить правильный диагноз (Бактериальный вагиноз, Вульвовагинальный кандидоз, Аэробный вагинит, Цервицит/вагинит, ассоциированный с генитальными микоплазмами). Более того, в исследование Флороценоз включены все микроорганизмы, которые влияют на выбор врачом тактики лечения.

Специалисты Центра молекулярной диагностики (CMD) разработали программы лабораторных исследований для диагностики урогенитальных инфекций. Тесты, входящие в программы позволяют выявить и определить концентрацию ДНК основных возбудителей ИППП (гонореи, хламидиоза, трихомониаза и инфекции, вызванной микоплазмой гениталиум), условно-патогенных микроорганизмов; в программе для женщин - оценить состояние микробиоценоза влагалища (диагностика бактериального вагиноза).

Урогенитальные инфекции у женщин (N.gonorrhoeae / C.trachomatis / M.genitalium / T.vaginalis // U.parvum/urealyticum/M.hominis // C.albicans/glabrata/crusei/parapsilosis и tropicalis // Бактериальный вагиноз), количественное определение ДНК

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

Соскоб/отделяемое из влагалища

Подготовка к исследованию

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Внимание: для получения достоверных результатов, анализы на выявление возбудителей бактериальных инфекций должны проводиться не менее чем через 2 недели после последнего приема антибактериальных препаратов.

Соскоб из урогенитального тракта( для женщин): Мазки не следует брать:

во время менструации;
ранее 24-48 часов после полового контакта.
ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;

Взятие соскоба из урогенитального тракта для ПЦР-диагностики проводится во всех офисах CMD.

Метод исследования

Исследование включает в себя количественное определение ДНК основных возбудителей заболеваний урогенитального тракта у женщин.

Показания к исследованию:

Скрининговое обследование с целью выявления ИППП
Обследование при наличии жалоб пациента и клинических проявлений инфекционно-воспалительного процесса
Обследование лиц, половые партнеры которых имеют перечисленные жалобы или установленный диагноз ИППП
Обследование при планировании беременности и во время беременности
Подготовка к операциям на органах мочеполовой системы

Референсные значения (вариант нормы):

Параметры	Референсные значения	Единицы измерения
Количество клеток в образце (параметр используется для клинической интерпретации)	>50 000
ДНК N. gonorrhoeae	Не обнаружено	ГЭ/мл
ДНК C. trachomatis	Не обнаружено	ГЭ/мл
ДНК M. genitalium	Не обнаружено	ГЭ/мл
ДНК T.vaginalis	Не обнаружено	ГЭ/мл
ДНК U. parvum/ urealyticum/ M. hominis	Не обнаружено	ГЭ/мл
ДНК C. albicans/ glabrata/ crusei/ parapsilosis и tropicalis	Не обнаружено	ГЭ/мл
Бактериальный вагиноз
Коэффициент соотношения Lactobacillus spp. к Bacteria Коэффициент соотношения Lactobacillus spp. к G.vaginalis и A.vaginae	Более «-1,0» Более «1,0»
ДНК Gardnerella vaginalis	Не более ДНК Lactobacillus spp	ГЭ/мл
ДНК Atopobium vaginae	Не более ДНК Lactobacillus spp	ГЭ/мл
ДНК Lactobacillus spp	Более 10 6 (не менее ДНК Bacteria)	ГЭ/мл
ДНК Bacteria(общее количество бактерий)	Не менее 10 6 (материал адекватный)	ГЭ/мл

Варианты заключений по тесту «Бактериальный вагиноз»:

На основании соотношений концентраций ДНК микроорганизмов бактериальный вагиноз не установлен.
Соотношения концентраций ДНК микроорганизмов соответствуют промежуточному состоянию микрофлоры.
Соотношения концентраций ДНК микроорганизмов соответствуют бактериальному вагинозу.
Соотношения концентраций ДНК микроорганизмов соответствуют дисбиозу неуточненной этиологии.
Количество бактерий недостаточно для анализа.
Снижение степени бактериальной обсемененности.

Выявление ДНК микроорганизмов свидетельствует о наличии возбудителей. При оценке результатов исследования на условно-патогенные микоплазмы (U. parvum/ urealyticum/ M. hominis) и кандиды (C. albicans/ glabrata/ crusei/ parapsilosis и tropicalis) необходимо учитывать, что данные возбудители встречаются и у здоровых лиц.

Читайте также: